维生素是生物生长和代谢所必需的微量有机物。分为脂溶性维生素和水溶性维生素两类。前者包括维生素A、维生素D、维生素E等，后者有B族维生素和维生素C。人和动物缺乏维生素时不能正常生长，并发生特异性病变，即所谓维生素缺乏症。目前随着国家对食品安全的重视，及国家GB5009. 82 — 2016新国标的执行，《食品安全国家标准 食品中维生素 A 、 D 、 E 的测定》，HPLC 法作为国标第一法测试维生素A,E及第四法测定维生素D的方法。此处，安捷伦液相色谱仪及EYELA前处理仪器则为新国标的实施诠释了完美的解决方案。
1、维生素A、D、E的测定原理：
食品或保健食品试样经过皂化后，经石油醚萃取，用液相色谱法分离，外标法定量。
检测试样举例：市售奶粉、奶粉伴侣、米粉、婴幼儿葡萄糖和复合维生素片维生素AD制剂或鱼肝油等样品。
2、试剂与材料
MILLIPORE MILLI-Q 一级超纯水
无水硫酸钠：化学纯
乙醇：色谱纯
氢氧化钾：化学纯
石油醚：沸程30 ℃～60 ℃，化学纯
甲醇：色谱纯
0.22um有机系针筒式微孔滤膜过滤器
维生素A,D,E 标准品，美国 SIGMA 公司
3、仪器和设备
AGILENT 1220II-DAD梯度高效液相色谱仪
旋转蒸发器EYELA N-1300V-WB
恒温震荡空气浴摇床：EYELA NTS-4000BH 用约5ml石油醚洗待测组分于50ml塑料离心管，EYELA MGS-2200氮吹仪吹干。
6) 用10ml色谱甲醇复溶解，涡旋混合仪混匀。
7) 样品过0.22μm滤膜，进样10ul上Agilent 1220HPLC.
5F维生素A、D、E 测定色谱
色谱柱：Agilent色谱柱：Prooshell 120 PFP;维生素:;维生素D:264nm。
波长检测方法：min 325nm，min 改变为294nm，5min左右切阀min改变为264nm.
柱温：35 ℃±2℃。
进样量：10 μL。
时间：15min
流动相：一维:甲醇,水;流速：:1ml/min;
维生素A D E 标准曲线的绘制
标准曲线的制作
本法采用外标法定量。将维生素A 和维生素 E 标准系列工作溶液分别注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以峰面积为纵坐标,以标准测定液浓度为横坐标绘制标准曲线,计算直线回归方程。
来源：仪器仪表网
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